Logo

Zkoumání vlivu délky máčení na nutriční kvalitu sena

Autor: Hannah Kruger, Hartpury University, 2022

KAPITOLA PRVNÍ: ÚVOD

Gastrointestinální trakt (GIT) koní je fyziologicky přizpůsoben stravě založené na objemovém krmivu. Přítomnost symbiotických mikrobiálních populací v celém GIT umožňuje fermentaci vlákniny ve velkém střevě (Dougal et al., 2014; Kauter et al., 2019). Výsledné produkty fermentace – těkavé mastné kyseliny (VFA), včetně acetátu, propionátu a butyrátu – představují hlavní zdroje energie, které mohou být přeměněny na glukózu a tuk nebo využity přímo v různých fázích energetických metabolických drah (Glinsky et al., 1976; Simmons a Ford, 1991; Vermorel, Martin-Rosset a Vernet, 1997; Coverdale et al., 2004).
Jílek vytrvalý a bojínek luční jsou převládající travní osiva pěstovaná ve Spojeném království (Gilliland, Johnston a Connolly, 2007). Obě tyto trávy jsou C3 druhy objemového krmiva, a proto mají vysokou stravitelnost sušiny (DM) a většinu svého obsahu ve vodě rozpustných sacharidů (WSC) soustředí ve stéble (Longland a Byrd, 2006). Šlechtění genotypových variací navíc zvýšilo produkci WSC v mnoha populacích jílků (Smith et al., 2001; Evans et al., 2011). Zvýšená dostupnost energeticky bohatého krmiva po celý rok může způsobit nerovnováhu mezi energetickým výdejem a příjmem ve stravě (Argo, 2009; Giles et al., 2014; Morrison et al., 2015). To je hlavní fyziologická příčina obezity, která představuje závažný zdravotní a welfare problém a zvyšuje náchylnost koní k metabolickým poruchám, jako je laminitida, poruchy regulace inzulínu a ekviní metabolický syndrom (McCue et al., 2015; Rendle et al., 2018). Nadměrná hmotnost zatěžuje také vnitřní orgány, což omezuje reprodukční i výkonnostní schopnosti (Vick et al., 2006; Dugdale et al., 2011). Obezita koní je ve Spojeném království rozšířeným problémem (Robin et al., 2015). Vlastníci koní uvádějí její výskyt podstatně méně často než odborníci z praxe a výzkumníci (Stephenson et al., 2011; Robin et al., 2015). I přesto studie ukazují rostoucí trend výskytu obezity mezi lety 2008 a 2017, přičemž hodnoty se pohybují v rozmezí 27,08 % – 72,2 % (Wyse et al., 2008; Stephenson et al., 2011; Giles et al., 2014; Robin et al., 2015; Menzies-Gow, Harris a Elliott, 2017).

Variabilita kvality objemového krmiva

Kvalita objemového krmiva je určena nutričním profilem neboli vzájemným poměrem jednotlivých složek v rostlinné struktuře. Buněčný obsah zahrnuje bílkoviny, cukry, škrob a pektin, zatímco buněčná stěna se skládá z hemicelulózy, celulózy, ligninu a nerozpustného popela. Tato část je při analýze označována jako neutrálně detergentní vláknina (NDF), případně může být dále rozložena na kyselinově detergentní vlákninu (ADF), která zahrnuje pouze celulózu a lignin (Soest a Wine, 1967). Stravitelnost se často používá také jako ukazatel kvality objemového krmiva (Burton, Hart a Lowrey, 1967; Griffin, Wangsness a Jung, 1980). Dostupnost energie přímo souvisí se stravitelností a mění se v závislosti na stupni vyspělosti rostliny (Darlington a Hershberger, 1968; Ragnarsson a Lindberg, 2008; Müller, 2011; Muhonen, Sadet-Bourgeteau a Julliand, 2021). Stravitelnost má negativní korelaci s rostoucím obsahem složek buněčné stěny (Edouard et al., 2008; Harris et al., 2017). Důvodem je strukturální zpevnění, které trávy potřebují v průběhu dozrávání pro podporu prodlužování stébel (Virkajärvi et al., 2012). Dochází tak k lignifikaci, tedy ke zvyšování koncentrace ligninu a hemicelulózové matrice ve druhotné buněčné stěně (Seppänen et al., 2010). Spolu s křížovým propojením se složkami kyseliny ferulové to snižuje stravitelnost polysacharidů buněčné stěny tím, že omezuje přístup mikroorganismů (Grabber et al., 2004; Jung et al., 2012).
Kvalita objemového krmiva a dostupnost živin jsou ovlivněny druhem rostliny. Sorensen et al. (2021) zjistili, že celkové koncentrace těkavých mastných kyselin (VFA) v céku se v rámci crossover studie s fistulovanými koňmi na izokalorických dietách významně lišily v závislosti na typu sena. Absorpce VFA nebyla v této studii měřena, nicméně rozdíly v produkci VFA v proximální části zadního střeva pravděpodobně vedou k rozdílnému množství dostupnému jako zdroj energie. Darlington a Hershberger (1968) a Vermorel, Martin-Rosset a Vernet (1997) rovněž analyzovali rozdíly v nutričním profilu mezi různými typy sena a zjistili významné rozdíly ve stravitelné a metabolizovatelné energii mezi jednotlivými druhy, ačkoli Martin-Rosset a Vernet (1997) zároveň podávali různé množství jadrného krmiva, což mohlo ovlivnit trávení objemového krmiva.
Kvalita objemového krmiva se také mění v závislosti na ročním období, teplotě prostředí a faktorech hospodaření. Druhy rostlin chladného klimatu nemají samoregulační mechanismus pro produkci fruktanu a dalších cukrů. V důsledku toho se nadbytečné množství vodou rozpustných sacharidů (WSC), které přesahuje potřeby růstu, ukládá (Watts a Chatterton, 2004; Longland a Byrd, 2006). Fotosyntéza navíc způsobuje denní (diurnální) kolísání uložených WSC (Longland, Cairns a Humphreys, 1999). Celková kombinace těchto kvalitativních proměnných určuje energetický obsah, stravitelnost, chutnost a dobrovolný příjem jednotlivých zdrojů objemového krmiva. Bez znalostmi podložených opatření vycházejících z rozdílů v energetické hodnotě krmiv bude praxe v oboru nevyhnutelně přispívat k epidemii obezity u koní a následně k řadě metabolických poruch.

Vliv máčení sena na obsah ve vodě rozpustných sacharidů a ztrátu hmotnosti

Omezení krmiva je jedním z hlavních způsobů, jak dosáhnout úbytku hmotnosti. Nicméně nedostatečné množství objemového krmiva pod 1,5 % tělesné hmotnosti (BW) negativně ovlivňuje zdraví žaludku. Je to důsledek změn pH způsobených sníženou tvorbou slin, které pufrují žaludeční kyselinu. Kůň je pak náchylnější k metabolickým poruchám, jako je ekviní syndrom žaludečních vředů, zejména pokud je dieta kombinována s vysokým obsahem škrobu, což je typické pro tradiční stravu domácích koní (Richards, Hinch a Rowe, 2006; Burk a Williams, 2008; Luthersson et al., 2009; Stowers et al., 2013). Zvýšené riziko mají také syndrom rabdomyolýzy a kolika, pokud nejsou splněny potřeby objemového krmiva, i když příčinný vztah nelze s jistotou předpokládat kvůli nedostatečné kontrole všech rušivých faktorů během výzkumu (Hudson et al., 2001; Durham, 2009; Harris a Rivero, 2017).
Frank et al. (2010) doporučili, aby hladiny nestrukturálních sacharidů (NSC) v seně (určené kombinací procent vodou rozpustných sacharidů a škrobu) byly pod 10 %, což napomáhá úbytku hmotnosti a snižuje riziko laminitidy a ekviního metabolického syndromu. Uváděné hodnoty NSC se pohybují v rozmezí 4,4–30 % z celkového obsahu sena (Francis et al., 2002; Borgia et al., 2011; Rodick a Jones, 2012; Shepherd et al., 2012). Nicméně pouze Borgia et al. (2011) uváděli hodnoty NSC pod 10 %. Toto může souviset i s cílem studie, která požadovala rozsah nutričních hodnot pro srovnání, nikoliv přesné zastoupení běžně dostupného složení objemového krmiva. Máčení krmiva je nejpoužívanější metodou, jak zajistit hladiny NSC pod 10 % v seně, které by jinak mělo příliš vysoký obsah cukrů a škrobu. Vysoké hladiny vodou rozpustných sacharidů (>18 %) vyvolávají rychlé zvýšení hladiny glukózy v krevní plazmě, uvolnění inzulínu a následný příjem glukózy buňkami v těle (Borgia et al., 2011; Shepherd et al., 2012). Pokud není energetický výdej dostatečný, glukóza je pak přeměněna na tuk.
V současné literatuře existují značné rozdíly a nesrovnalosti v množství živin, které se při máčení snižují, přičemž většina studií se zaměřuje na snížení obsahu vodou rozpustných sacharidů (WSC) jako metody ke snížení energetické hodnoty krmiva. Máčení v rozmezí od 20 minut do 3 hodin vedlo k poklesu WSC o 5–10 % (Longland, Barfoot a Harris, 2011). Blackman a Moore-Colyer (1998) zaznamenali významné ztráty minerálů (p < 0,001) draslíku (K), hořčíku (Mg) a mědi (Cu) při podobné délce máčení, avšak u obsahu WSC během této doby významný pokles nezjistili. Na základě těchto studií kvalita a nutriční složení sena před máčením představují rozhodující faktory, které určují, zda bude po máčení obsah nestrukturálních sacharidů (NSC) pod doporučenou hranicí 10 %. Delší máčení v rozmezí 9 až 24 hodin bylo spojeno se snížením WSC o 27–70 % (Longland, Barfoot a Harris, 2011; Moore-Colyer et al., 2014; Müller, Nostell a Bröjer, 2016). Nižší hodnota tohoto rozmezí pochází ze studií zaměřených na napodobení průmyslových podmínek máčení. To naznačuje, že efektivita máčení objemového krmiva závisí na okolnostech, zejména na dostupných zařízeních a odborných znalostech. Toto by mělo být zohledněno při navrhování experimentálních podmínek i při formulaci doporučení pro běžné majitele koní. Vyšší hodnoty snížení byly zaznamenány u jednotlivých složek WSC, jako jsou glukóza, fruktóza a fruktan. Celkový obsah WSC nemusí klesnout v takové míře, i když Müller, Nostell a Bröjer (2016) uvedli pokles WSC o 60 % po 24 hodinách máčení, což odpovídalo 3,8 % z celkového obsahu sena. Tato studie dospěla k závěru, že 24 hodin je nepřiměřeně dlouhá doba máčení. To však může být způsobeno tím, že procento WSC v původním, předmáčeném seně bylo již nízké (9,5 %).
Předchozí výzkumy v této oblasti používaly různé typy sena, množství vody a teplotu, stejně jako různé metody analýzy, přičemž tyto proměnné nebyly mezi studiemi kontrolovány. To může ovlivnit opakovatelnost metod, protože tyto faktory mění rychlost fyzikálních a chemických změn v rostlinném materiálu. Následně tyto rozdíly představují potenciální omezení spolehlivosti a platnosti výsledků. Přesto panuje obecná shoda, že koncentrace vodou rozpustných sacharidů (WSC) má negativní korelaci s délkou doby máčení; rozsah této změny však ovlivňují faktory řízení máčení a původní nutriční obsah krmiva.
Nutriční změny v objemovém krmivu jsou hlavním faktorem ovlivňujícím rozdíly v úspěšnosti hubnutí mezi koňmi krmenými namáčeným senem a těmi, kteří dostávají seno bez namáčení. Běžná nutriční praxe pro hubnutí bez namáčení zahrnuje odstranění jadrných krmiv a podávání energeticky omezených dávek, založených na procentu tělesné hmotnosti (BW), především z objemového krmiva (Van Weyenberg et al., 2008; Argo et al., 2012). Bamford et al. (2019) ukázali úspěch tohoto přístupu tím, že omezili dietu 12 obézních koní na 1,25 % BW na bázi sušiny (DM) a zaznamenali průměrný pokles tělesné hmotnosti o 7,7 ± 2,1 % během 12 týdnů. Tento výsledek však platil pro koně, kteří byli zároveň zařazeni do cvičebního programu. Koně, u nichž byla manipulována pouze dieta, zaznamenali pokles tělesné hmotnosti pouze o 6,2 ± 4,3 %, což však bylo stále statisticky významné (p < 0,001). Gill et al. (2016) zkoumali vliv 10–20% omezení energetických požadavků s příjmem sušiny v rozmezí 1,25–1,5 % BW a zjistili pokles tělesné hmotnosti o 5,98 % a snížení skóre tělesné kondice (BCS) o 1,4 bodu na konci 26týdenního sledování. Ačkoliv tento protokol vedl k úbytku hmotnosti, období zkoušky probíhalo v zimních měsících, kdy přirozeně dochází k poklesu tělesné hmotnosti, což vyvolává otázky, zda by výsledky byly udržitelné v jiných ročních obdobích. Někteří koně byli také v intenzivně řízených podmínkách bez přístupu na pastvu, což nereprezentuje mnoho obézních koní v praxi, kteří mají pravidelný nebo stálý přístup ke spásání.
Argo, Dugdale a McGowan (2015) zkoumali, zda krmení namáčeným senem v množství 1,25 % tělesné hmotnosti (BW) na bázi sušiny vede k většímu úbytku hmotnosti než stejné množství čerstvého sena, jak to provedli Argo et al. (2012). Výsledky ukázaly týdenní pokles tělesné hmotnosti v prvním týdnu o 0,98 ± 0,10 %, což naznačuje odhadované dvojnásobné zvýšení úbytku hmotnosti ve srovnání s dietou založenou na suchém objemovém krmivu. McGowan et al. (2013) rovněž krmili namáčeným senem v množství 1,25 % BW na bázi sušiny a zaznamenali průměrný pokles tělesné hmotnosti o 6,8 % během šestiměsíčního období. Ve svém experimentu také specifikovali, že máčení vedlo ke snížení obsahu vodou rozpustných sacharidů (WSC) o 38 %. Na základě těchto výsledků se zdá, že máčení objemového krmiva je udržitelnějším přístupem k úbytku hmotnosti než samotné omezení krmiva. Pravděpodobně má také minimální dopad na pohodu koní ve srovnání s jinými metodami, které mohou ohrozit roli stálého přísunu objemového krmiva pro zdraví trávicího traktu koní.

Vliv máčení sena na složky vlákniny

Existuje méně studií zabývajících se vlivem máčení na strukturované sacharidy, tedy vlákninu v krmivu, jako jsou frakce ADF a NDF. Argo, Dugdale a McGowan (2015) uvedli, že máčení vedlo ke snížení zjevné stravitelnosti všech živin kromě ADF a hrubého proteinu (CP), jejichž hodnoty naopak vzrostly. Tyto výsledky souhlasí s pracemi Moore-Colyer et al. (2014) a Mack et al. (2014), kteří rovněž zaznamenali nárůst ADF. Mack et al. (2014) navíc naznačili, že máčení může zvýšit i podíl NDF. Procentuální nárůsty pravděpodobně vyplývají jak ze zvýšení koncentrace vlákniny, tak ze snížení obsahu nestukturálních složek krmiva, což mění poměr mezi strukturálními a nestukturálními složkami (Collins, 1991).
Vláknina představuje nejméně stravitelné části rostlinné hmoty. Přesto mohou být tyto údaje důležité při zvažování celkového energetického obsahu a příjmu krmiva u obézních zvířat, protože mohou ovlivnit konečnou dostupnou stravitelnou energii. Současná literatura popisuje snížení procenta WSC a tedy dostupné energie po máčení. To naznačuje, že vyšší podíly ADF a NDF mohou přispět ke snížení energetického přísunu u obézních zvířat. Pokud by však máčení zároveň zvyšovalo stravitelnost strukturálních složek rostlinné hmoty, mohlo by to tento celkový pokles energie vyrovnat. Identifikace optimálních časových intervalů máčení, které zajistí nejlepší poměr živin pro maximální zdravý úbytek hmotnosti, by proto mohla poskytnout jasnější obraz o nejlepší praxi v oboru.

Účel, konkrétní cíle a předpoklady

Cílem této studie bylo porovnat vliv různých dob máčení na obsah sušiny (DM), neutrálně detergentní vlákniny (NDF), kyselinou detergentní vlákniny (ADF) a vodou rozpustných sacharidů (WSC) u jednoho typu sena.
Cíle tohoto výzkumu byly tedy následující:
  • Stanovit medián obsahu sušiny (DM) u vzorků namočených po dobu 0, 1, 2, 4, 8 a 12 hodin, zjistit, zda existuje statisticky významný rozdíl mezi některými skupinami, a pokud ano, určit mezi kterými skupinami.
  • Stanovit medián obsahu neutrálně detergentní vlákniny (NDF) u vzorků namočených po dobu 0, 1, 2, 4, 8 a 12 hodin, zjistit, zda existuje statisticky významný rozdíl mezi některými skupinami, a pokud ano, určit mezi kterými skupinami.
  • Stanovit medián obsahu kyselinou detergentní vlákniny (ADF) u vzorků namočených po dobu 0, 1, 2, 4, 8 a 12 hodin, zjistit, zda existuje statisticky významný rozdíl mezi některými skupinami, a pokud ano, určit mezi kterými skupinami.
  • Stanovit medián obsahu vodou rozpustných sacharidů (WSC) u vzorků namočených po dobu 0, 1, 2, 4, 8 a 12 hodin, zjistit, zda existuje statisticky významný rozdíl mezi některými skupinami, a pokud ano, mezi kterými konkrétními skupinami.
Hypotézy studie byly tedy následující:
Nulová hypotéza: Mezi různými dobami máčení nebude žádný rozdíl v obsahu sušiny (DM).
Alternativní hypotéza: Mezi různými dobami máčení bude existovat rozdíl v obsahu sušiny (DM).
Nulová hypotéza: Mezi různými dobami máčení nebude žádný rozdíl v obsahu neutrálně detergentní vlákniny (NDF).
Alternativní hypotéza: Mezi různými dobami máčení bude existovat rozdíl v obsahu neutrálně detergentní vlákniny (NDF).
Nulová hypotéza: Mezi různými dobami máčení nebude žádný rozdíl v obsahu kyselinou detergentní vlákniny (ADF).
Alternativní hypotéza: Mezi různými dobami máčení bude existovat rozdíl v obsahu kyselinou detergentní vlákniny (ADF).
Nulová hypotéza: Mezi různými dobami máčení nebude žádný rozdíl v obsahu vodou rozpustných sacharidů (WSC).
Alternativní hypotéza: Mezi různými dobami máčení bude existovat rozdíl v obsahu vodou rozpustných sacharidů (WSC).

KAPITOLA DRUHÁ: METODY

Studie využila kvantitativní průřezový design s metodami založenými na výzkumech Blackmana a Moore-Colyera (1998) a Longlanda, Barfoota a Harrise (2011). Etický souhlas byl získán od Etické komise Hartpury University před zahájením sběru dat; referenční číslo etiky ETHICS2021-32-LR. Externí doporučení k výběru nejvhodnější metody bylo získáno od Baileys Horse Feeds. Byly získány tři malé balíky sena ze zásob již používaných a dostupných na Hartpury Equine. Tyto balíky pocházely ze stejné dodávky a zdroje, aby se omezily rozdíly v kvalitě a druzích trav mezi balíky. Veškerý sběr dat probíhal na univerzitním kampusu.

Průběh experimentu

Tři balíky sena byly vybrány ze seníku na Hartpury Equine pomocí stratifikovaného náhodného výběru. Krajní části každého balíku byly vyřazeny, protože tyto části mohly být před zbytkem balíku vystaveny odlišným environmentálním podmínkám. Zbytek balíku byl poté rozdělen na tři stejné části. Z každé části bylo odebráno přibližně 3 kg sena, přičemž se dbalo na to, aby vzorek zahrnoval seno ze všech částí balíku, což zajistilo reprezentativnost vzorku pro celý balík sena. Vzorky o hmotnosti 3 kg z jednotlivých balíků byly následně smíchány dohromady, jak to provedli Moore-Colyer et al. (2014), a poté bylo do tří velko-okých síťek na seno naplněno po 2,8 kg smíchaného sena. Očekávalo se, že mírné protřesení sena pro lepší promíchání nebude mít vliv na obsah živin (Longland, Barfoot a Harris, 2011).
Z každé síťky na seno byly odebrány dvě 50g vzorky pro analýzu původního, předmáčeného sena. Každý vzorek byl jasně označen předem stanoveným kódem, uložen v plastovém sáčku s těsným uzávěrem a zapečetěn, aby nedošlo ke ztrátě živin před laboratorní analýzou. Následně byla každá síťka se senem umístěna do 40litrového plastového kýble a zalita studenou vodou z kohoutku až po okraj, aby seno bylo zcela ponořené. Tím byla standardizována množství vody a tím i podmínky máčení u všech síťek a vzorků.
Máčení v jednotlivých nádobách je běžný přístup používaný v jezdeckých stájích, protože mnoho z nich nemá přístup k větším zařízením na máčení. Tento způsob tak dobře reprezentuje skutečné podmínky máčení v oboru (Longland, Barfoot a Harris, 2014). Každá síťka sena sloužila jako experimentální opakování a byla označena písmeny A, B a C. Všechny síťky byly namočeny po dobu 12 hodin a z každé byly odebrány dva vzorky v časech 1, 2, 4, 8 a 12 hodin. Délky máčení byly zvoleny tak, aby reprezentovaly běžné praktiky, kdy se seno namáčí krátkodobě mezi krmeními během dne nebo přes noc. Podobný postup zvolily i předchozí studie (Blackman a Moore-Colyer, 1998; Longland, Barfoot a Harris, 2011; Argo, Dugdale a McGowan, 2015). Během odběru vzorků byla také měřena teplota vody, protože Longland, Barfoot a Harris (2014) zjistili, že teplota vody významně ovlivňuje množství ztracených vodou rozpustných sacharidů. K měření byla použita laboratorní skleněná teploměrka a hodnoty byly odečítány na několika místech v kýblech, aby co nejvíce odpovídaly teplotě celého objemu vody.
Při každém odběru vzorků byly síťky na seno z vody odebírány jednu po druhé, začínaje síťkou A, a nechány krátce odkapat po dobu 2 minut před zvážením na přenosných závěsných vahách, což umožnilo porovnání jejich hmotnosti před namočením a tím stanovení kapacity absorpce vody. Následně byly odebrány dvě 100g vzorky mokrého sena ze středu a spodní části síťky a uloženy do malých hliníkových nádobek. Síťka na seno byla poté vrácena do původního kbelíku s vodou a vzorky sena byly rozstříhány na kousky dlouhé 3 až 6 cm před opětovným zvážením, aby byla zajištěna standardizovaná a správná hmotnost. Tento proces byl opakován u každé síťky ve stejném pořadí, aby byla zajištěna standardizace doby namáčení. Množství mokrých vzorků sena bylo při odběru po dvou hodinách zvýšeno na 110 g, protože bylo zjištěno, že síťky mají vysokou schopnost zadržovat vodu a laboratorní požadavky vyžadovaly, aby velikost vzorku byla minimálně 50 g na suché hmotnosti. Hmotnost odebraných vzorků v době odběru také odpovídala doporučením Longlanda, Barfoota a Harrise (2011), což usnadňuje srovnání. Nicméně byly podstatně menší než vzorky odebrané Argem, Dugdalem a McGowanem (2015).
Odebrané a zvážené mokré vzorky byly převezeny do laboratoře na univerzitním kampusu, kde byly podrobeny kombinaci sušení v peci při teplotě 50 °C a sušení na vzduchu při pokojové teplotě po dobu 4 dnů. Sušení na vzduchu bylo navrženo externími poradci, aby se zabránilo tvorbě plísňových spor během přepravy do laboratoří. Vzhledem však k chladnému klimatu v době odběru bylo také nutné použít sušení v peci, aby bylo dosaženo dostatečného vysušení. Po vysušení byly vzorky opět zváženy a následně zabaleny stejným způsobem jako suché vzorky. Jeden soubor vzorků z každé síťky a doby namáčení byl zaslán do Homes Laboratory v Ohiu (USA) k mokré chemické analýze pro stanovení sušiny (DM), neutrálně detergentní vlákniny (NDF) a kyseliny detergentní vlákniny (ADF). Druhý soubor vzorků byl zaslán do Sciantec Analytical (Velká Británie) ke stanovení rozpustných cukrů (WSC) podle standardních laboratorních postupů.

Statistická analýza

Po obdržení výsledků byla shromážděná data zadána do programu Microsoft Excel pro jejich zpracování a následně analyzována pomocí SPSS (IBM, verze 26). Nejprve byly provedeny deskriptivní statistiky pro stanovení mediánů každé skupiny vzorků (vzorky byly seskupeny podle doby namáčení). Data byla poté testována na normální rozdělení pomocí Shapiro-Wilkova testu vzhledem k malému počtu vzorků. Většina dat byla shledána jako parametrická, nicméně tři hodnoty byly neparametrické (viz příloha f). Jelikož to vyvolalo pochybnosti o splnění předpokladů parametrických testů rozdílů, byly použity neparametrické testy, které nevyžadují žádné předpoklady o rozdělení vzorků (Dytham, 2010). Následně byl proveden Friedmanův dvoucestný ANOVA test podle pořadí (ranks) za účelem zjištění, zda existuje statisticky významný rozdíl ve hodnotách DM, NDF, ADF a WSC mezi jednotlivými skupinami vzorků. Tento test byl zvolen kvůli vzájemné souvislosti vzorků v rámci studie (Fields, 2017). Byla předpokládána 95% interval spolehlivosti, tedy p < 0,05 znamenalo statisticky významný výsledek. Po zjištění významného rozdílu byly provedeny párové porovnání pomocí post hoc testu, aby bylo možné blíže určit, mezi kterými skupinami se rozdíl nachází. K úpravě chyb způsobených vícenásobným testováním byla použita Bonferroniho korekce. Data z hodin 0 a 1, 2 a 4, a 8 a 12 byla rovněž sloučena a Friedmanovy dvoucestné ANOVA testy podle pořadí byly spuštěny znovu, aby bylo možné získat podrobnější přehled o změnách v nutričním složení v průběhu času.

Etické aspekty

Tento projekt nevyužíval žádné živé subjekty ani účastníky, a proto vyvolával pouze omezené etické otázky. Hlavním aspektem byla bezpečnost dat. Všechna data byla uložena v souladu s pokyny univerzity na účtu Hartpury University OneDrive, aby se snížilo riziko poškození souborů.

KAPITOLA TŘETÍ: VÝSLEDKY

Během doby namáčení byly zaznamenány menší změny teploty, přičemž teplota vody se během dne pohybovala mezi 4–6 °C. Hmotnost síťky na seno se zvyšovala s absorpcí vody (viz tabulka 1). Přestože hmotnost vzorků při odběru přesně odpovídala 100 g nebo 110 g, rozdíly v sušení vedly k tomu, že po vysušení měly vzorky hmotnost mezi 25–55 g při opětovném zvážení před zabalením. To však neovlivnilo schopnost laboratoří provést všechny požadované testy. Jelikož byl WSC (rozpustné cukry) jedinou nutriční složkou analyzovanou v samostatné laboratoři, bylo provedeno srovnání obsahu vlhkosti mezi oběma laboratořemi, aby byla zajištěna konzistence výsledků. Laboratoř Sciantec Analytical (UK) poskytla hodnotu vlhkosti spolu s výsledky, zatímco obsah vlhkosti pro každý vzorek z Homes Laboratory byl vypočítán podle rovnice (m = 100 - d), kde m představuje obsah vlhkosti a d je uváděná hodnota sušiny (DM) vzorku. Data o obsahu vlhkosti byla pomocí Shapiro-Wilkova testu označena za parametrická, proto byl proveden Pearsonův korelační test. Byl zjištěn statisticky významný vztah mezi obsahem vlhkosti ve výsledcích Holmes a Sciantec, r = 0,719, p = 0,001 (viz obrázek 1).
Tabulka 1: Hmotnosti síťky na seno při jednotlivých dobách namáčení
Doba namáčení (hodiny)Hmotnost síťky na seno A (kg)Hmotnost síťky na seno B (kg)Hmotnost síťky na seno C (kg)
02.82.82.8
18.08.17.8
28.18.28.1
48.69.28.7
88.79.48.9
129.49.58.9

Obsah sušiny podle doby namáčení

Obsah sušiny (DM) byl měřen jako procento z celkového obsahu vzorku. Medián DM u předem nenamočených vzorků sena (0 hodin) byl 86,390 (IQR = 86,100 – 86,790). Hodnoty DM během doby namáčení klesaly (viz obrázek 2), i když tento pokles nebyl statisticky významný (X²(5) = 11,000, p = 0,051). Průměrný procentuální rozdíl DM mezi jednotlivými časy namáčení a předem nenamočenými vzorky sena je uveden v tabulce 2. Přestože nebyly zjištěny významné výsledky, při sloučení dat do tří skupin podle doby namáčení byl zjištěn statisticky významný pokles, X²(2) = 9,333, p = 0,009. Post hoc párová porovnání ukázala, že významný rozdíl byl mezi obsahem DM na začátku namáčení (0–1 hodina) a v polovině doby namáčení (2–4 hodiny) (p = 0,012).
//dodelat texty a obrazky a grafy

KAPITOLA ČTVRTÁI: DISKUZE

Cílem studie bylo porovnat vliv různých dob namáčení na obsah sušiny (DM), neutrálně detergentní vlákniny (NDF), kyselé detergentní vlákniny (ADF) a rozpustných cukrů (WSC) v seně, s cílem identifikovat nejlepší postup pro efektivní snížení hmotnosti u obézních koní. Úkoly studie spočívaly ve stanovení mediánu obsahu DM, NDF, ADF a WSC u vzorků namočených po 0, 1, 2, 4, 8 a 12 hodin a v zjištění, zda existuje významný rozdíl mezi jednotlivými skupinami. Byly určeny celkové významné změny v nutričním složení krmiva a hypotézy byly podle toho přijaty nebo zamítnuty.

Vliv namáčení na obsah sušiny

V aktuální studii byl u namočeného sena zjištěn procentuální pokles obsahu sušiny (DM) v rozmezí od 12,66 % do 42,41 % (viz tabulka 2). Při analýze jednotlivých časů namáčení nebyly nalezeny statisticky významné rozdíly mezi skupinami, avšak při seskupení časů do obdobných intervalů byl zjištěn významný pokles mezi skupinou 0–1 hodiny a skupinou 2–4 hodiny (p = 0,012). Následně byla přijata alternativní hypotéza a zamítnuta nulová hypotéza. Tyto výsledky jsou výrazně nižší než výsledky několika předchozích studií, které uváděly mnohem vyšší procentuální poklesy v rozmezí 72,06–81,02 % při namáčení sena po dobu 3–16 hodin (Longland, Barfoot a Harris, 2011; Argo, Dugdale a McGowan, 2015; Muller, Nostell a Bröjer, 2016). To je poněkud překvapivé vzhledem k tomu, že medián hodnoty DM čerstvého, předem nenamočeného sena (86,39 %) byl v rozmezí hodnot uváděných těmito studiemi (82,70 %, 87,34 % a 84,30 %), a doby namáčení byly rovněž srovnatelné. Jedním z možných vysvětlení těchto rozdílů může být variabilita v množství vody na kilogram sena, které ovlivňuje úroveň absorpce vody. Longland, Barfoot a Harris (2011) namáčeli 2kg části sena v 65litrových vanách obsahujících 24 litrů vody a uváděli, že síťky na seno vážily po pouhých 20 minutách namáčení 4,4násobek své původní hmotnosti. Síťky na seno v aktuální studii byly namáčeny v menších vanách (40 l) a přestože přesné množství vody není známo, síťky měly podobnou velikost, takže pravděpodobně bylo použito méně vody. Přesto se absorpce s časem zvyšovala (viz tabulka 1). Síťky na seno vážily v průměru jen 9,27 ± 0,32 kg po 12 hodinách namáčení, což odpovídá 3,3násobku jejich původní hmotnosti, avšak při zohlednění 1,28 kg sena odebraného jako vzorky je nárůst hmotnosti 6,1násobkem hmotnosti sušiny.
Nedostatek statisticky významných rozdílů mezi původními skupinami podle doby namáčení může být důsledkem menšího počtu vzorků ve srovnání s většinou dostupné literatury (Blackman a Moore-Colyer, 1998; Longland, Barfoot a Harris, 2011; Muller, Nostell a Bröjer, 2016). Menší počet vzorků vede k širšímu intervalu spolehlivosti a většímu významu jednotlivých výsledků vzorků (Hackshaw, 2008). Množství sena namáčeného najednou také mohlo hrát roli. Argo, Dugdale a McGowan (2015) provedli jak namáčení síťek na seno běžně používané v průmyslu, tak i namáčení menších testovacích vzorků, a zjistili větší variabilitu v poklesu obsahu sušiny (DM) u opakování plných síťek na seno. To naznačuje, že seno nemusí při namáčení velkých síťek absorbovat vodu rovnoměrně po celé síťce. To by ztížilo lidem z praxe přesně měřit příjem sušiny jejich zvířaty, což je zásadní při indukci úbytku hmotnosti pomocí krmení.
Bez ohledu na nesrovnalosti ve vztahu mezi dobou namáčení, nárůstem vlhkosti a procenty sušiny (DM) byl při zohlednění rozsahu i mediánů jednotlivých časových intervalů namáčení stále pozorován pokles DM. Tento pokles je velmi důležitý pro majitele a pečovatele koní, protože většina diet je kalkulována na základě procenta sušiny tělesné hmotnosti (BW). Pokud síťky na seno nejsou před namáčením zváženy, může to způsobit neúmyslný deficit kalorií ve stravě, což může mít vážné zdravotní důsledky pro zvíře (Argo, Dugdale a McGowan, 2015).

Vliv namáčení na obsah vlákniny

Namáčení sena vedlo k pozitivní korelaci mezi obsahem NDF a ADF a délkou doby namáčení. U obou složek byl pozorován statisticky významný nárůst (p = 0,004); proto byla přijata alternativní hypotéza a zamítnuta nulová hypotéza. Změny obsahu NDF byly charakterizovány procentuálním nárůstem o 14,83–15,06 % oproti hodnotám při 0 hodinách (viz tabulka 2). Tento nárůst je mírně vyšší než hodnoty zaznamenané v předchozí literatuře, kde se pohyboval mezi 7,78–13,59 % při namáčení sena po dobu 7–16 hodin (Mack et al., 2014; Argo, Dugdale a McGowan, 2015). Medián hodnoty NDF u čerstvého sena (65,84 %) se shodoval s hodnotami z těchto studií (64,76–68,40 %), proto není pravděpodobné, že by rozdíly ve zralosti odebraného krmiva byly hlavní příčinou rozdílů v procentuálním nárůstu (Ragnarsson a Lindberg, 2008). Výsledky obsahu ADF odpovídaly nárůstu o 6,11–15,57 % oproti hodnotám čerstvého sena na bázi sušiny (viz tabulka 2). Horní hranice těchto hodnot odpovídá dřívějším výzkumům, které uváděly nárůst 15,06–15,45 % při namáčení po dobu 8–16 hodin (Mack et al., 2014; Moore-Colyer et al., 2014; Argo, Dugdale a McGowan, 2015). Odpovídající doby namáčení v této studii (8–12 hodin) byly ty, u kterých byl zaznamenán významný nárůst ve srovnání se skupinou 0–1 hodina (p = 0,004). Procenta ADF u čerstvého, předem nenamočeného sena (36,860 % na základě sušiny vzduchem sušené – AS a 42,670 % na základě sušiny – DM) byla rovněž pozoruhodně podobná dříve publikovaným datům. Hodnoty 37,39–38,38 % byly nalezeny na bázi DM, přestože se lišil typ sena a demografické charakteristiky zdrojů sena (Mack et al., 2014; Argo, Dugdale a McGowan, 2015). To naznačuje, že obsah ADF je více ovlivněn zralostí rostlin než variabilitou druhu a denními změnami, na rozdíl od jiných nutričních složek, jako jsou rozpustné cukry (WSC).
Procentuální nárůsty zaznamenané u složek NDF i ADF jsou pravděpodobně způsobeny jak zvýšenou koncentrací vlákniny, tak snížením ne-strukturálních složek krmiva (Collins, 1991). Pozorovaný pokles sušiny (DM) je jedním z vysvětlení pro zvýšení vlákniny. Vláknina se totiž měří v procentech, a protože celková sušina klesá, hodnoty strukturálních složek, které zůstaly stabilní, se na bázi sušiny relativně zvýší. I když by to znamenalo, že podíl vlákniny nemá vliv na čistou spotřebu energie, je to přínosné pro obézní koně s velkou potřebou příjmu potravy, protože to umožňuje delší dobu žvýkání bez přidání kalorického obsahu z většího množství krmiva (Janis et al., 2010). Výzkumy se však liší v názoru, zda zvýšený obsah vlákniny ovlivňuje dobrovolný příjem potravy. Fleurance et al. (2009) uvedli, že obsah vlákniny u různých typů krmiva nebyl korelován s dobrovolným příjmem, zatímco Edouard et al. (2008) naznačili, že příjem může mít nepřímý vztah se zvyšujícím se obsahem NDF, i když individuální variabilita byla vysoká. Vzhledem k tomu by výsledky této studie mohly znamenat pokles množství namočeného sena konzumovaného na bázi sušiny. Nicméně požívání krmiva s vysokým obsahem vlákniny je výrazně pomalejší než u méně zralých zdrojů (Muller, 2011). Následně není pravděpodobné, že snížení množství přijímaného krmiva povede k dlouhým obdobím bez příjmu potravy, a může být užitečné při podporování postupného úbytku hmotnosti díky snížení celkové spotřeby energie.
Vlákninová část rostlin je převážně nerozpustná kvůli nedostatku specifických enzymů na rozklad ligninu v trávicím traktu savců (Van Soest, 1963). Současné výsledky tedy naznačují, že změny v množství ADF složky mohou být klíčovým faktorem úspěšného snížení celkového kalorického obsahu sena. Namáčení však bylo také zjištěno, že zvyšuje stravitelnost ADF složky sena o 13,5 % (Argo, Dugdale a McGowan, 2015).
To je pravděpodobně způsobeno fyzikálními a chemickými změnami způsobenými hydrofilní povahou celulózy (Chami Khazraji a Robert, 2013). Tyto změny spouštějí dezintegraci struktury rostlinné buněčné stěny a následně umožňují větší dostupnost pro mikrobiální trávení (Longland, Barfoot a Harris, 2014). Bez zohlednění dalších složek by se zdálo, že to zvyšuje hrubou energetickou dostupnost, a proto by namáčení bylo neúčinnou metodou při snižování energetické dostupnosti píce. Navzdory tomu Argo, Dugdale a McGowan (2015) zjistili, že po korekci hodnot na základě DM byly ztráty všech ostatních živin významně sníženy, což vedlo k 23,5% ztrátě průměrného příjmu stravitelné energie ve srovnání s předem namočeným senem.

Účinek namáčení na obsah sacharidů rozpustných ve vodě

Byl zjištěn významný inverzní vztah mezi množstvím WSC (vodou rozpustných cukrů) a dobou máčení; proto byla přijata alternativní hypotéza a nulová hypotéza byla zamítnuta. Koncentrace WSC byly výrazně sníženy při každém časovém období máčení, přičemž k největšímu průměrnému poklesu došlo po 8 hodinách (-47,20 %). Tyto výsledky jsou výrazně vyšší než ty, které byly zaznamenány v předchozích studiích, kde byl zjištěn pokles WSC o 27–37 % při dobách máčení mezi 7 a 16 hodinami (Longland, Barfoot a Harris, 2011; Moore-Colyer et al., 2014; Argo, Dugdale a McGowan, 2015). Jedním z možných vysvětlení těchto výsledků jsou rozdíly v teplotě vody a okolního prostředí v době máčení (Longland, Barfoot a Harris, 2014). Podmínky stanovené Longlandem, Barfootem a Harrisem (2011) však zahrnovaly vyšší průměrné teploty (8 °C) a delší doby máčení než současná studie, ale přesto vedly k menším procentuálním ztrátám. Procentuální ztráty v této studii se rovněž více podobaly letním hodnotám snížení u Longlanda, Barfoota a Harrise (2014), kteří zaznamenali průměrnou teplotu 16 °C (snížení o 30 %, 33 % a 46 % při 1, 3 a 16 hodinách), než zimním hodnotám s průměrnou teplotou 8 °C (12 %, 15 % a 28 % při 1, 3 a 16 hodinách). Rozdíly v typech sena a jejich vlastnostech mohou rovněž vysvětlovat rozdíly ve ztrátách bez ohledu na podmínky prostředí. Ačkoliv metodologie a vzorky této studie neumožnily zkoumání tohoto aspektu, seno nebylo výrazně hrubé ani listnaté, což naznačuje střední seč. Výsledky odpovídaly těm, které uvedli Mack et al. (2014), kteří zaznamenali průměrné snížení WSC o 51,41 %. Ve zmíněné studii však nebyly kontrolovány typ sena ani podmínky máčení, a proto nelze výsledky přímo porovnávat.
Významné rozdíly (p = 0,028) zjištěné mezi začátkem máčení (0–1 hodina) a koncem máčení (8–12 hodin), a mezi střední fází (2–4 hodiny) a koncem máčení poskytují náhled na časová období, která mohou být nezbytná k dosažení zásadního snížení obsahu WSC za účelem redukce kalorického obsahu sena. Frank et al. (2010) navrhli, že obsah WSC nižší než 10 % by podporoval úbytek hmotnosti. Současné výsledky ukazují, že těchto hodnot lze dosáhnout máčením po dobu 8 a více hodin, jelikož mediány odpovídaly hodnotám 16,77 %, 8,15 %, 10,15 % a 10,49 % pro 0, 1, 2 a 4 hodiny a 7,51 % a 7,16 % pro 8 a 12 hodin. Pro přesné určení koncentrací WSC v individuálních dietách by však bylo zapotřebí provést laboratorní analýzu vzorků sena z dostupné populace sena pro daného koně.

OMEZENÍ STUDIE

Během procesu sušení před balením a odesláním vzorků do laboratoří nebylo možné všechny vzorky najednou umístit do dostupné sušárny na Hartpury Equine. To vedlo k nedostatku standardizace mezi vzorky, pokud jde o jejich individuální poměr doby sušení v sušárně a na vzduchu, a o pořadí, v jakém to bylo provedeno. To pravděpodobně způsobilo rozdíly v hmotnosti vzorků po sušení. Ačkoliv to neovlivnilo schopnost laboratoře provádět všechny potřebné testy a procedury, může to mít vliv na platnost a spolehlivost výsledků založených na AS. V důsledku toho se při analýze výsledků soustředili na význam hodnot sušiny (DM), aby se omezily rozdíly způsobené variací při sušení a pro usnadnění porovnání s dříve publikovanými daty.
Malá velikost vzorku může být také omezujícím faktorem v tomto výzkumu, protože vede k vyšší standardní chybě, což může snížit statistickou sílu výsledků (Hackshaw, 2008). Velikost vzorku také zvyšuje obtížnost v rozlišování výsledků způsobených odlehlými hodnotami a náhodnými variacemi na rozdíl od skutečného efektu nezávislé proměnné. To mohlo zvýšit nebo snížit významnost některých výsledků v této práci, nicméně použití neparametrických testů by mělo omezit rozsah tohoto vlivu.

OBLASTI BUDOUCÍHO VÝZKUMU

Další výzkum zaměřený na nutriční změny u běžně používaných druhů sena při máčení po dobu 8–12 hodin by umožnil formulovat konkrétnější směrnice. Dlouhodobé studie sledující pokrok při úbytku hmotnosti koní, kteří jsou krmeni máčeným senem při různých procentních podílech tělesné hmotnosti, jsou také nezbytné pro získání přehledu o praktických a fyziologických důsledcích nutriční variace. To by poskytlo podrobnější a důkazně podložené základy pro použití konkrétních technik máčení sena jako přístupu k hubnutí. Konečnější výzkum by také mohl pomoci regulačním orgánům a vzdělávacím institucím vytvořit komplexní směrnice týkající se tohoto přístupu pro širší distribuci.

KAPITOLA PÁTÁ: ZÁVĚR

Tato studie měla za cíl zjistit dobu máčení, která je potřebná k výrazné změně nutričních složek sena. Výsledky studie potvrzují poklesy obsahu sušiny (DM) a WSC (vodou rozpustné cukry) v seně a zvýšení obsahu ADF (kyselý detergentní vláknina) a NDF (neutrální detergentní vláknina) při máčení po 1, 2, 4, 8 a 12 hodinách. Statistická analýza ukázala významný rozdíl (p<0,05) v obsahu vlákniny a WSC v seně po 8-12 hodinách máčení v porovnání s hodnotami po 0-1 hodinách. Na základě těchto výsledků lze určit, že doba máčení 8-12 hodin by měla být dostatečná k vyčerpání hladin WSC a zvýšení podílu vlákniny na úroveň, která je v současnosti doporučována pro zdravou redukci hmotnosti u koní. Další výzkum zaměřený na analýzu úbytku hmotnosti dosaženého různými nutričními poměry by umožnil vytvoření přesnějších programů hubnutí. Výzkum kvantifikující nutriční změny při máčení v dané délce v různých druzích trávy a environmentálních klimátech by také byl nezbytný pro vytváření energeticky vypočítaných diet bez potřeby individuální analýzy krmiva.

SEZNAM LITERATURY

  • Argo, C.M., (2009). Hodnocení obézního poníka: tělesná kondice a obezita. Vet J, 179, s. 158-160.
  • Argo, C.M., Curtis, G.C., Grove-White, D., Dugdale, A.H., Barfoot, C.F. a Harris, P.A., (2012). Rezistence vůči úbytku hmotnosti: Další úvaha o nutričním managementu obézních koní. The Veterinary Journal, 194(2), s. 179-188.
  • Argo, C.M., Dugdale, A.H. a McGowan, C.M., (2015). Úvahy o použití omezených, máčených senových diet pro podporu úbytku hmotnosti při řízení metabolického syndromu a obezity u koní. The Veterinary Journal, 206(2), s. 170-177.
  • Bamford, N.J., Potter, S.J., Baskerville, C.L., Harris, P.A. a Bailey, S.R., (2019). Vliv diety s omezeným příjmem a cvičení nízké intenzity na úbytek hmotnosti a inzulinovou senzitivitu u obézních koní. Journal of Veterinary Internal Medicine, 33(1), s. 280-286.
  • Blackman, M. a Moore-Colyer, M.J.S., (1998). Seno pro koně: účinky tří různých ošetření máčením na obsah prachu a živin. Animal Science, 66(3), s. 745-750.
  • Borgia, L., Valberg, S., McCue, M., Watts, K. a Pagan, J., (2011). Glykémické a inzulinové odpovědi na krmení sena s různým obsahem nestrukturních sacharidů u kontrolních koní a koní postižených polysacharidovou myopatií. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition, 95(6), s. 798-807.
  • Burk, A.O. a Williams, C.A., (2008). Praktiky krmné managementu a používání doplňků u koní na vrcholových závodech. Comparative Exercise Physiology, 5(2), s. 85-93.
  • Burton, G.W., Hart, R.H. a Lowrey, R.S., (1967). Zlepšení kvality pícnin v bermudagrassu šlechtěním 1. Crop Science, 7(4), s. 329-332.
  • Chami Khazraji, A. a Robert, S., (2013). Interakční účinky mezi celulózou a vodou v nanokrystalických a amorfních oblastech: Nový přístup využívající molekulární modelování. Journal of Nanomaterials, 2013.
  • Collins, M., (1991). Sušení sena a máčení ve vodě: Účinky na složení a trávení listových a stonkových složek vojtěšky. Crop Science, 31(1), s. 219-223.
  • Coverdale, J.A., Moore, J.A., Tyler, H.D. a Miller-Auwerda, P.A., (2004). Sojové slupky jako alternativní krmivo pro koně. Journal of Animal Science, 82(6), s. 1663-1668.
  • Darlington, J.M. a Hershberger, T.V., (1968). Účinek zralosti pícnin na stravitelnost, příjem a nutriční hodnotu vojtěšky, timothy a jabloňové trávy u koní. Journal of Animal Science, 27(6), s. 1572-1576.
  • Dougal, K., de la Fuente, G., Harris, P.A., Girdwood, S.E., Pinloche, E., Geor, R.J., Nielsen, B.D., Schott, H.C., Elzinga, S. a Newbold, C.J., (2014). Charakterizace fekální bakteriální komunity u dospělých a starších koní krmených dietou s vysokým obsahem vlákniny, oleje nebo škrobu pomocí 454 pyrosequencování. PloS One, 9(2), s. e87424.
  • Dugdale, A.H.A., Curtis, G.C., Harris, P.A. a Argo, C.M., (2011). Hodnocení tělesného tuku u poníka: část I. Vztahy mezi anatomickým rozložením tukové tkáně, tělesnou kompozicí a tělesnou kondicí. Equine Veterinary Journal, 43(5), s. 552-561.
  • Durham, A.E., (2009). Role výživy v kolice. Veterinary Clinics of North America: Equine Practice, 25(1), s. 67-78.
  • Dytham, C. (2010) Výběr a použití statistiky: Průvodce pro biology. 3. vydání. Wiley Blackwell.
  • Edouard, N., Fleurance, G., Martin-Rosset, W., Duncan, P., Dulphy, J.P., Grange, S., Baumont, R., Dubroeucq, H., Perez-Barberia, F.J. a Gordon, I.J., (2008). Dobrovolný příjem a stravitelnost u koní: účinek kvality pícnin se zaměřením na individuální variabilitu. Animal, 2(10), s. 1526-1533.
  • Evans, J.G., Fraser, M.D., Owen, I. a Davies, D.A., (2011). Hodnocení dvou kultivarů vytrvalé rašeliny (AberDart a Fennema) pro produkci ovcí v horských oblastech. The Journal of Agricultural Science, 149(2), s. 235-248.
  • Fields, A. (2017). Objevování statistiky pomocí IBM SPSS. SAGE Publishing.
  • Fleurance, G., Fritz, H., Duncan, P., Gordon, I.J., Edouard, N. a Vial, C., (2009). Okamžitá rychlost příjmu u koní různých tělesných velikostí: vliv biomasy a vláknitosti trávy. Applied Animal Behaviour Science, 117(1-2), s. 84-92.
  • Francis, S.A., Chapman, D.F., Doyle, P.T., Leury, B.J. a Egan, A.R., (2002). Obsah nestrukturních sacharidů v kultivaru vytrvalé rašeliny vyšlechtěné pro vysoký obsah cukrů ve srovnání s „normální“ vytrvalou rašelinou a bílým jetelím. Animal Production in Australia, 24, s. 73-76.
  • Frank, N., Geor, R.J., Bailey, S.R., Durham, A.E. a Johnson, P.J., (2010). Metabolický syndrom u koní. Journal of Veterinary Internal Medicine, 24(3), s. 467-475.
  • Giles, S.L., Rands, S.A., Nicol, C.J. a Harris, P.A., (2014). Prevalence obezity a související rizikové faktory u domácích koní a poníků žijících venku. PeerJ, 2, s. e299.
  • Gill, J.C., Pratt-Phillips, S.E., Mansmann, R. a Siciliano, P.D., (2016). Řízení úbytku hmotnosti u koní ve vlastnictví klientů. Journal of Equine Veterinary Science, 39, s. 80-89.
  • Gilliland, T.J., Johnston, J. a Connolly, C., (2007). Přehled použití semen pícnin a jetelů v Severním Irsku, UK, v letech 1980-2004. Grass and Forage Science, 62(3), s. 239-254.
  • Glinsky, M.J., Smith, R.M., Spires, H.R. a Davis, C.L., (1976). Měření rychlostí produkce těkavých mastných kyselin v slepém střevě poníka. Journal of Animal Science, 42(6), s. 1465-1470.
  • Grabber, J.H., Ralph, J., Lapierre, C. a Barrière, Y., (2004). Genetické a molekulární základy degradovatelnosti buněčné stěny trávy. I. Interakce lignin–matrice buněčné stěny. Comptes rendus biologies, 327(5), s. 455-465.
  • Griffin, J.L., Wangsness, P.J. a Jung, G.A., (1980). Hodnocení kvality pícnin dvou teplomilných travních druhů pomocí laboratorních a zvířecích měření.
  • 1. Agronomy Journal, 72(6), s. 951-956.
  • Hackshaw, A., (2008). Malé studie: silné stránky a omezení. European Respiratory Journal, 32(5), s. 1141-1143.
  • Harris, P.A. a Rivero, J.L.L., (2017). Nutriční úvahy pro syndrom rabdomyolýzy u koní. Equine Veterinary Education, 29(8), s. 459-465.
  • Harris, P.A., Ellis, A.D., Fradinho, M.J., Jansson, A., Julliand, V., Luthersson, N., Santos, A.S. a Vervuert, I., (2017). Krmení konzervovanými pícninami u koní: nedávné pokroky a doporučení. Animal, 11(6), s. 958-967.
  • Hudson, J.M., Cohen, N.D., Gibbs, P.G. a Thompson, J.A., (2001). Krmné postupy spojené s kolikou u koní. Journal of the American Veterinary Medical Association, 219(10), s. 1419-1425.
  • Janis, C.M., Constable, E.C., Houpt, K.A., Streich, W.J. a Clauss, M., (2010). Porovnávací studie příjmu potravy a žvýkání u domácích koní a skotu: pilotní výzkum. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition, 94(6), s. e402-e409.
  • Jung, H.J.G., Samac, D.A. a Sarath, G., (2012). Modifikace plodin za účelem zvýšení stravitelnosti buněčné stěny. Plant Science, 185, s. 65-77.
  • Kauter, A., Epping, L., Semmler, T., Antao, E.M., Kannapin, D., Stoeckle, S.D., Gehlen, H., Lübke-Becker, A., Günther, S., Wieler, L.H. a Walther, B., (2019). Mikrobiom trávicího traktu koní: současný výzkum equinního enterálního mikrobiomu a budoucí perspektivy. Animal Microbiome, 1(1), s. 1-15.
  • Longland, A.C. a Byrd, B.M., (2006). Nestrukturní sacharidy pastvy a laminitida u koní. The Journal of Nutrition, 136(7), s. 2099S-2102S.
  • Longland, A.C., Barfoot, C. a Harris, P.A., (2011). Účinky máčení na obsah vodou rozpustných sacharidů a hrubého proteinu v senu. Veterinary Record, 168(23), s. 618-618.
  • Longland, A.C., Barfoot, C. a Harris, P.A., (2014). Účinky doby, teploty vody a agitace na ztrátu vodou rozpustných sacharidů a proteinu ze travní pícniny: implikace pro řízení krmení koní. Veterinary Record, 174(3), s. 68-68.
  • Longland, A.C., Cairns, A.J. and Humphreys, M.O., (1999). Seasonal and diurnal changes in fructan concentration in Lolium perenne: implications for the grazing management of equines predisposed to laminitis. Proceedings: 16th Equine Nutritional Physiology Society, Raleigh, NC, pp.258-259.
  • Longland, A.C., Cairns, A.J. a Humphreys, M.O., (1999). Sezónní a denní změny v koncentraci fruktanu v Lolium perenne: implikace pro řízení pastvy u koní predisponovaných k laminitidě. Proceedings: 16th Equine Nutritional Physiology Society, Raleigh, NC, s. 258-259.
  • Mack, S.J., Dugdale, A.H., Argo, C.M., Morgan, R.A. a McGowan, C.M., (2014). Dopad máčení na nutriční složení sen v UK. The Veterinary Record, 174(18), s. 452.
  • McCue, M.E., Geor, R.J. a Schultz, N., (2015). Equinní metabolický syndrom: komplexní onemocnění ovlivněné genetikou a prostředím. Journal of Equine Veterinary Science, 35(5), s. 367-375.
  • McGowan, C.M., Dugdale, A.H., Pinchbeck, G.L. a Argo, C.M., (2013). Dietní restrikce v kombinaci s nutraceutickým doplňkem pro řízení equinního metabolického syndromu u koní. The Veterinary Journal, 196(2), s. 153-159.
  • Menzies-Gow, N.J., Harris, P.A. a Elliott, J., (2017). Prospektivní kohortová studie hodnotící rizikové faktory pro vznik laminitidy spojené s pastvou ve Spojeném království. Equine Veterinary Journal, 49(3), s. 300-306.
  • Moore-Colyer, M.J.S., Lumbis, K., Longland, A. a Harris, P., (2014). Účinek pěti různých metod máčení na obsah živin a koncentraci mikroorganismů v senu pro koně. PLoS One, 9(11), s. e114079.
  • Morrison, P.K., Harris, P.A., Maltin, C.A., Grove-White, D., Barfoot, C.F. a Argo, C.M., (2015). Vnímání obezity a praktiky jejího řízení v populaci majitelů koní a nadšenců ve Spojeném království, kteří se věnují rekreačním aktivitám. Equine Obesity: Concepts and Mechanisms, s. 51.
  • Muhonen, S., Sadet-Bourgeteau, S. a Julliand, V., (2021). Účinky rozdílů ve složení vlákniny a zralosti pícninových diet na mikrobiální ekosystém a jeho aktivitu v céku a tlustém střevě koní, v trávicích šťávách a ve výkalech. Animals, 11(8), s. 2337.
  • Müller, C.E., (2011). Příjem sena s fermentovaným siláží u koní, sklizeného v různých fázích zralosti rostlin. Applied Animal Behaviour Science, 134(3-4), s. 144-151.
  • Müller, C.E., Nostell, K. a Bröjer, J., (2016). Metody pro snížení obsahu rozpustných sacharidů ve vodě v travních pícninách pro koně. Livestock Science, 186, s. 46-52.
  • Ragnarsson, S. a Lindberg, J.E., (2008). Nutriční hodnota sena z timothy hnoje u islandských koní. Livestock Science, 113(2-3), s. 202-208.
  • Rendle, D., McGregor Argo, C., Bowen, M., Carslake, H., German, A., Harris, P., Knowles, E., Menzies-Gow, N. a Morgan, R., (2018). Equinní obezita: aktuální perspektivy. UK-Vet Equine, 2(Sup5), s. 1-19.
  • Richards, N., Hinch, G.N. a Rowe, J.B., (2006). Účinek současných krmných praktik s obilím na fermentaci škrobu v zadním traktu a acidózu u australského dostihového plnokrevníka. Australian Veterinary Journal, 84(11), s. 402-407.
  • Robin, C.A., Ireland, J.L., Wylie, C.E., Collins, S.N., Verheyen, K.L.P. a Newton, J.R., (2015). Prevalence a rizikové faktory obezity u koní ve Velké Británii na základě majiteli hlášených skóre tělesné kondice. Equine Veterinary Journal, 47(2), s. 196-201.
  • Rodiek, A.V. a Jones, B.E., (2012). Dobrovolný příjem čtyř typů sena u koní. Journal of Equine Veterinary Science, 32(9), s. 579-583.
  • Seppänen, M.M., Pakarinen, K., Jokela, V., Andersen, J.R., Fiil, A., Santanen, A. a Virkajärvi, P., (2010). Odezva na vernalizaci u Phleum pratense a její vztah k lignifikaci stonků a přechodu do květu. Annals of Botany, 106(5), s. 697-707.
  • Shepherd, M.L., Pleasant, R.S., Crisman, M.V., Werre, S.R., Milton, S.C. a Swecker Jr, W.S., (2012). Účinky sena s vysokým a středním obsahem nestrukturálních sacharidů na koncentrace inzulínu, glukózy, triglyceridů a leptinu u obézních arabských hřebců. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition, 96(3), s. 428-435.
  • Simmons, H.A. a Ford, E.J.H., (1991). Glukoneogeneze z propionátu produkovaného v colonu koně. British Veterinary Journal, 147(4), s. 340-345.
  • Smith, K.F., Simpson, R.J., Culvenor, R.A., Humphreys, M.O., Prud'Homme, M.P. a Oram, R.N., (2001). Účinky ploidie a fenotypu, který vyvolává vysokou koncentraci vody rozpustných sacharidů na akumulaci sacharidů, výživovou hodnotu a morfologii trvalé jílek (Lolium perenne L.). The Journal of Agricultural Science, 136(1), s. 65-74.
  • Soest, P.V., (1963). Použití detergentů při analýze vláknitých krmiv. II. Rychlá metoda pro stanovení vlákniny a ligninu. Journal of the Association of Official Agricultural Chemists, 46(5), s. 829-835.
  • Soest, P.V. a Wine, R.H., (1967). Použití detergentů při analýze vláknitých krmiv.
  • Soest, P.V. a Wine, R.H., (1967). IV. Stanovení složek buněčné stěny rostlin. Journal of the Association of Official Analytical Chemists, 50(1), s. 50-55.
  • Sorensen, R.J., Drouillard, J.S., Douthit, T.L., Ran, Q., Marthaler, D.G., Kang, Q., Vahl, C.I. a Lattimer, J.M., (2021). Účinek typu sena na cecální a fekální mikrobiom a parametry fermentace u koní. Journal of Animal Science, 99(1), s. skaa407.
  • Stephenson, H.M., Green, M.J. a Freeman, S.L., (2011). Prevalence obezity v populaci koní ve Spojeném království. The Veterinary Record, 168(5), s. 131.
  • Stowers, N.L., Waldron, L.A., Pryor, I.D., Hill, S.R. a O'Brien, J., (2013). Vliv dvou krmiv na bázi vojtěšky, FiberProtect® a FiberEdge®, na syndrom žaludečních vředů u koní. Journal of Applied Animal Nutrition, 2.
  • Van Weyenberg, S., Hesta, M., Buyse, J. a Janssens, G.P.J., (2008). Vliv úbytku hmotnosti v důsledku energetické restrikce na metabolický profil a toleranci glukózy u poníků. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition, 92(5), s. 538–545.
  • Vermorel, M., Martin-Rosset, W. a Vernet, J., (1997). Využití energie z dvanácti krmiv nebo směsných diet pro udržení sportovních koní. Livestock Production Science, 47(2), s. 157–167.
  • Vick, M.M., Sessions, D.R., Murphy, B.A., Kennedy, E.L., Reedy, S.E. a Fitzgerald, B.P., (2006). Obezita je spojena se změněnou metabolickou a reprodukční aktivitou u klisen: účinky metforminu na inzulinovou senzitivitu a reprodukční cykličnost. Reproduction, Fertility and Development, 18(6), s. 609–617.
  • Virkajärvi, P., Saarijärvi, K., Rinne, M. a Saastamoinen, M., (2012). Fyziologie travin a její vztah k výživné hodnotě při krmení koní. V Pícniny a pastva ve výživě koní (str. 17–43). Wageningen Academic Publishers, Wageningen.
  • Watts, K.A. a Chatterton, N.J., (2004). Přehled faktorů ovlivňujících hladiny sacharidů v píci. J. Equine Vet. Sci., 24(2), str. 84–87.
  • Wyse, C.A., McNie, K.A., Tannahil, V.J., Love, S. a Murray, J.K., (2008). Prevalence obezity u jezdeckých koní ve Skotsku.
Autor: Hannah Kruger, Hartpury University, 2022